核心使用步骤
1. 消毒与准备- 使用前用 70% 酒精擦拭腔体内部及托盘，紫外照射消毒 30 分钟 。
- 检查 O 型密封圈是否完好，确保扣件无变形，保证气密性 。
2. 放置样品
- 将细胞培养皿、多孔板或培养瓶放入内置托盘，注意不要遮挡进出气口 。
- 扣紧上盖，通过旋转不锈钢扣件均匀压缩 O 型圈，形成密封环境 。
3. 气体置换（关键）
- 连接气管：进气口接气体源（预混气或双流量计混合气），出气口通大气或排风 。
- 设定流量：调节流量计至 8-19 L/min（具体视腔体体积而定，通常约 8L 容积） 。
- 排气时间：持续通气 1-2 分钟（或至少 10 倍腔体体积的气体量），彻底置换内部空气 。
- 关闭阀门：先关进气阀，再关排气阀，迅速断开气管并密封接口 。
4. 培养与维护
- 将密封好的小室放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中恒温培养 。
- 换液操作：需打开时动作要快，操作完毕后立即重新充气密封，避免低氧环境长时间破坏 。
- 稳定性：密封良好情况下，氧气浓度漂移在 24 小时内通常小于 0.1% 。
两种常见控氧方案
- 预混气方案：直接购买固定浓度（如 1% O₂, 5% CO₂, 94% N₂）的混合气瓶，配合单流量计使用，适合非精确低氧研究 。
- 精确控氧方案：使用双流量计混合高纯氧气和氮气（均含 5% CO₂），配合氧电极监测，可实现 0-100% 任意浓度精确控制 。
注意事项
- 压力控制：气瓶减压阀输出压力需 ≤0.15 MPa，防止高压损坏腔体或消声器弹开 。
- 避免频繁开启：每次开启都会破坏气体平衡，需重新换气，不适合需要频繁动态干预的实验 。
- 湿度问题：腔室内无主动加湿，长时间培养需注意培养基蒸发，建议缩短单次培养周期或使用湿化辅助 。